幾個相差顯微鏡使用注意事項和技巧？

　　1)安裝相差裝置：將普通顯微鏡的聚光鏡卸下，將帶環顯微鏡狀光欄的聚光鏡裝到相匹配的顯微鏡上；將顯微鏡的普通物鏡卸下，換上帶位相板的物鏡；將目鏡換成相差顯微鏡專用的調焦目鏡；在光源進光處放置專用的綠色濾光片(有時可以不用)。

　　2) 對光和聚焦：通過調焦目鏡放大鏡和粗細調節螺旋的調節，直至視野中可清晰地看到有一個白圈和一個黑圈。黑圈是固定的，白圈則可通過聚光鏡裝置上的調節螺旋加以移動，使黑圈與白圈完全重合。取下調焦目鏡，換上顯微鏡原來的目鏡，即可進行檢查。

　　相差顯微鏡使用中的問題分析

　　1、樣品厚度的影響 當進行相差觀察時，樣品的厚度應該為5μm或者更薄，當采用較厚的樣品時，樣品的上層是很清楚的，深層則會模望遠鏡糊不清並且會產生相位移干擾及光的散射干擾。

　　2、蓋玻片和載玻片的影響 樣品一定要蓋上蓋上蓋玻片，否則環狀光闌的亮環和相板的暗環很難重合。相差觀察對載玻片和蓋玻片的玻璃質量也有較高的要求，當有劃痕，厚薄不均或凹凸不平時會產生亮環歪斜及相位干擾。另外玻片過厚或過薄時會使環狀光闌亮環變大或變小。

　　3、暈輪和漸暗效天文望遠鏡應 在相差顯微鏡成像過程中，某一結構由於相位的延遲而變暗時，並不是光的損失，而是光在像平面上重新分配的結果。因此在黑暗區域明顯消失的光會在較暗物體的 周圍出現一個明亮的暈輪。這是相差顯微鏡的缺點，它妨礙了精細結構的觀察，當環狀光闌很窄時暈輪現像更為嚴重。相差顯微鏡的另一個現像是漸暗效應，指相差 觀察相位延遲相同的較大區域時，該區域邊緣會出現反差下降。

　　4、相位倒轉 當n’n時得到像金相顯微鏡的明暗反差正好相 反，稱為相位倒轉。當相位差δ=0時是無法識別的，隨著δ的增大反差變大，當δ繼續增大到某一值後會出現相位倒轉。用90%高吸光值(高反差)物鏡時，這 個轉變值約為0。55λ，用70%標准吸光值的物鏡時約為0。33λ。較高吸光值的物鏡應該用於分辨較小的光程差。


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